bieżnia antygrawitacyjna warszawa

Zatem, w odróżnieniu od insuliny, która jest znana z działania poprzez translokację GLUT4 (29), FGF-21 może przede wszystkim działać poprzez regulację w górę komórkowego GLUT1 w tych komórkach. Oprócz zmian w GLUT1 obserwowaliśmy niewielką redukcję poziomów GLUT4 po 48 i 72 godzinach stymulacji komórkowej FGF-21 (Figura 1F). Podczas gdy stymulacja FGF-21 powodowała obniżenie poziomów GLUT4 in vitro, nie wydawało się to mieć negatywnego wpływu na wychwyt glukozy (Figura 1C), co sugeruje, że spadek nie jest wystarczający do wpływania na transport glukozy lub że inne mechanizmy kompensacyjne działają w Adipocyty 3T3-L1. Ponadto zaobserwowaliśmy polepszoną wrażliwość na insulinę u gryzoni z cukrzycą FGF-21 podawanych nawet w warunkach wymuszonej nadekspresji u myszy transgenicznych FGF-21a lub po 8 tygodniach ciągłej stałej infuzji FGF-21 u myszy db / db (Figura 4G i dane nie pokazane). Zatem zmniejszenie obserwowane w GLUT4 w adipocytach 3T3-L1 wydaje się nie mieć znaczenia funkcjonalnego. FGF-21 jest typową cząsteczką FGF pod względem jej zdolności do stymulacji aktywacji MAPK i fosforylacji FRS-2 (25) (Figura 2A). Przeciwnie, podczas gdy heparyna lub cząsteczki podobne do heparyny są uważane za istotne dla biologicznej aktywności białek z rodziny FGF (30), żadna z wywoływanych przez FGF-21a odpowiedzi in vitro obserwowanych w 3T3-L1 lub ludzkich adipocytach nie była heparyną. regulowane. Co ważne, wydaje się, że FGF-21 jest nieaktywny mitogenicznie in vitro, gdy testowano go na kilku liniach komórkowych wrażliwych na FGF i komórkach pierwotnych (Figura 3). To dalej ustanawia FGF-21 jako unikalne białko w obrębie rodziny FGF, ponieważ FGF są dobrze znane z indukowania proliferacji (1. 5). Podczas gdy dokładna przyczyna niemitogennego charakteru działania FGF-21 in vitro nie jest obecnie znana, dane te pomagają znacząco w walidacji FGF-21 jako potencjalnego terapeutyku białkowego. Fakt, że FGF-21 indukował fosforylację tyrozyny FGFR-1 i FGFR-2 (Figura 2B) sugeruje, że te cząsteczki mogą działać jako receptory FGF-21. Chociaż zawierają one łatwo wykrywalne i funkcjonalne cząsteczki FGFR-1 i / lub FGFR-2, nie jest jednak obecnie jasne, dlaczego kilka komórek wrażliwych na FGF, które badano pod kątem aktywności biologicznej FGF-21, nie reaguje na stymulację FGF-21. Co więcej, we wstępnych eksperymentach ze wszystkimi dostępnymi w handlu białkami fuzyjnymi FGFR zewnątrzkomórkowej domeny Fc (systemy R & GD), nie byliśmy w stanie wykazać bezpośredniej interakcji pomiędzy którymkolwiek z tych wariantów FGFR i FGF-21, pomimo faktu, że wyraźnie zaobserwowaliśmy wiązanie dla obu FGF. -1 i FGF-2 (dane nie pokazane). Zatem, FGF-21 może oddziaływać fizycznie z różnymi wariantami składania FGFR-1 i FGFR-2, które są indukowane po różnicowaniu adipocytów. Alternatywnie zależna od FGF-21a aktywacja tych receptorów może wymagać specyficznej modyfikacji komórki tłuszczowej lub dodatkowego kofaktora. FGF-21 nie stymulował wychwytu glukozy na wrażliwych na insulinę klonach wątrobowych 9 i mięśniowych komórkach L6-GLUT-4myc i na fibroblastach 3T3-L1. Ponadto, nie byliśmy w stanie wykryć aktywności FGF-21 w testach proliferacji na kilku liniach komórkowych i pierwotnych komórkach o różnym charakterze, co dodatkowo wskazuje, że działanie FGF-21 może być specyficzne dla adipocytów. Niemniej jednak ostatnio zaobserwowaliśmy wyraźną odpowiedź FGF-21 na komórki pochodzenia niefatowego. Nieoczekiwanie FGF-21 (1 .g / ml) wykazał skuteczność w modulowaniu wydzielania glukagonu z izolowanych wysepek szczurzych (Figura 7), natomiast nie zaobserwowano wpływu na wydzielanie insuliny. W związku z tym należy dalej badać swoistość bioaktywności FGF-21. Figura 7FGF-21 hamuje wydzielanie glukagonu w wyizolowanych szczurzych wysepkach trzustkowych. Pokazane wartości (. SE) są średnią z 6 pomiarów. * P <0,05 i ** P <0,02 w porównaniu do kontroli pojazdu. Wysepki stymulowano, jak wskazano, FGF-21 w obecności różnych stężeń glukozy. Podawanie FGF-21 myszom ob / ob i db / db z cukrzycą oraz otyłym szczurom ZDF prowadziło do znacznego obniżenia poziomu glukozy i trójglicerydów we krwi, jak również do obniżenia poziomów insuliny na czczo i poprawienia klirensu glukozy podczas OGTT (Fig. 4, Ryc. AH) [hasła pokrewne: choroba dwubiegunowa objawy, ciśnienie krwi normy, choroba behceta ]