Choroby związane z przechowywaniem glikogenu prezentujące się jako kardiomiopatia przerostowa cd

Gdy były dostępne, zbadano próbki patologiczne. Wszystkie wartości są podane jako średnie . SD. Badania genetyczne
Geny kodujące ciężki łańcuch .-miozyny, białko C wiążące miozynę C, troponinę sercową T, troponinę sercową I, aktynę sercową, zasadniczy łańcuch lekki miozyny, regulatorowy łańcuch lekki miozyny, .-tropomiozynę i PRKAG2 sekwencjonowano z genomowego DNA jako opisane wcześniej. 18 18 Egzony od do 8, 9a i 9b LAMP2, eksony 2 do 20 GAA i eksony do 7 GLA amplifikowano za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) i sekwencjonowano i porównano z Numery dostępu do GenBank AC002476, NT_024915 i AL035422 za pomocą starterów dostępnych w Internecie (http://genetics.med.harvard.edu/~seidman/). Warianty sekwencji potwierdzono przez trawienie enzymem restrykcyjnym. Warianty segregowane ze stanem klinicznym u członków rodziny i które nie występowały u 180 zdrowych osób, które zostały dopasowane do pacjentów z przerostową kardiomiopatią na tle rasowym lub etnicznym (zgłoszone przez samego siebie) uznano za mutacje wywołujące chorobę18, 19 i oznaczono je w standardowej nomenklaturze .20 Allele LAMP2 zostały rozróżnione przez polimorfizmy pojedynczego nukleotydu 156A / T i 927 C / T, ponumerowane zgodnie z komplementarnym DNA (cDNA) (numer dostępu w GenBank NM_013995).
RNA ekstrahowano za pomocą Trizolu (Invitrogen). Przeprowadziliśmy odwrotną transkrypcję (RT) przy użyciu zestawu (One-Step RT-PCR, Qiagen) ze starterami dostępnymi w Internecie (http://genetics.med.harvard.edu/~seidman/).
Analizy białek
Analizy Western blot przeprowadzono w buforze do immunoprecypitacji z użyciem 30 do 40 .g lizatów białkowych z limfocytów lub fibroblastów, jak opisano wcześniej, 21 z przeciwciałami poliklonalnymi LAMP2 i dehydrogenazą gliceraldehydo-3-fosforanu (GAPDH) (Santa Cruz Biotechnology).
Analizy histopatologiczne
Próbki badano po barwieniu hematoksyliną i eozyną oraz immunohistochemią LAMP2. Badania elektronowo-mikroskopowe osadzonej tkanki wykonano po usunięciu parafiny za pomocą wcześniej opisanych procedur.9
Elektrokardiografia
Standardowe 12-odprowadzeniowe zapisy elektrokardiograficzne zostały przebadane pod kątem prekursji komorowej i napięcia w lewej komorze (zgłaszane jako maksymalna fala S w V1 lub V2 + maksymalna fala R w V5 lub V6 [SV1 lub SV2 + RV5 lub RV6] lub maksymalne ugięcie R lub S w dowolnym tropie22).
Wyniki
Siedemdziesiąt pięć niepowiązanych pacjentów z kardiomiopatią przerostową (30 kobiet i 45 mężczyzn, 12 do 75 lat w chwili rozpoznania) zostało prospektywnie włączonych do analizy genetycznej mutacji sarkomeru-białka. Maksymalna grubość ściany lewej komory wahała się od 13 do 60 mm, a u czterech osób przekraczała 30 mm. Oprócz typowych elektrokardiograficznych przejawów kardiomiopatii przerostowej, 3,18 trzech osób miało krótkie interwały PR, a trzy inne miały schematy prekursorowe komorowe. Czterdzieści mutacji genu sarkomerów-białek zidentyfikowano u tych 75 pacjentów.6,23 U pozostałych 35 pacjentów (w tym 27 mężczyzn i 8 kobiet) przeanalizowano sekwencje PRKAG2, LAMP2, GLA i GAA. Nie zidentyfikowano mutacji w sekwencjach GLA lub GAA.
Rysunek 1
[patrz też: foreverslim cena, nadżerkowe zapalenie przełyku, powiększone węzły chłonne pod pachami ]
[podobne: choroby psów, choroby tarczycy objawy, ciśnienie krwi normy ]