przychodnia ul kamieńskiego wrocław

Liczbę płytek tethering do powierzchni monowarstw analizowano klatka po klatce (50 klatek na sekundę) w ciągu pierwszych 5. 10 sekund przepływu. We wszystkich badaniach, każda komórka tworząca kontakt adhezyjny przez więcej niż 40 milisekund była oceniana jako spętana płytka. Translokację zdefiniowano jako ruch płytek większy niż średnica komórki od punktu początkowego przywiązania. Stacjonarna adhezja została zdefiniowana jako komórki nie poruszające się więcej niż jedna średnica komórki w ciągu 10-sekundowego okresu czasu. Badania obrazowania płytek krwi. Badania immunofluorescencji ludzkich płytek krwi przeprowadzono w sposób opisany uprzednio (11), stosując przeciwciało 5D2 (0,76 .g / ml). W badaniach skaningowej mikroskopii elektronowej (SEM), całą objętą antykoagulacją pełną krew perfundowano przez rozprowadzanie pojedynczych warstw płytek w 600 sś1 przez 2 minuty. Adherentne płytki krwi przygotowano do SEM, jak opisano wcześniej (14). W celu obrazowania powstawania skrzeplin w czasie rzeczywistym (patrz Figura 3c), interakcje między płytkami a kolagenem i następnie wzrost skrzeplin obserwowano stosując fluorescencyjną mikroskopię konfokalną (× 63, Leica TCS SP, Leica, Heidelberg, Niemcy) i monitorowano w 1-minutowych odstępach w ciągu 5-minutowego okresu. Skrzep został zrekonstruowany w Voxblast (Vaytek Inc., Fairfield, Iowa, USA), a całkowita objętość skrzepu i maksymalna wysokość zakrzepów w danej dziedzinie (obejmująca 25 192. M2) zostały obliczone przy użyciu ImageTool (University of Texas Health and Science Center of San Antonio, University of Texas, San Antonio, Texas, USA). Ryc. 3 Rola względna vWf osocza i płytek krwi w inicjowaniu agregacji płytek pod przepływem. Krew pełną znakowaną fluorescencyjnie od normalnego dawcy (normalna krew) lub pacjenta z vWD (krew vWD) poddawano perfuzji na wstępnie uformowanych monowarstwach przygotowanych z płytek krwi od zdrowego dawcy (normalna monowarstwy) lub od pacjenta z vWD (monowarstwą vWD) we wskazanej postaci. współczynniki ścinania. Określono poziom uwięzienia płytek krwi w pierwszych 5 sekundach przepływu (a) i 5 sekundach przepływu po 30 sekundach perfuzji (b). Wyniki przedstawiono jako średnie. SEM (n = 5). Uwaga: Zmniejszenie liczby płytek tetheringowych pomiędzy 30. 35 sekund w stosunku do 0. 5 sekund odzwierciedla zmniejszenie liczby reaktywnych miejsc dostępnych do wychwytu płytek krwi w wyniku zwiększonej adhezji płytek krwi. (c i d) Rola płytek vWf w promowaniu wzrostu skrzepliny przy silnym ścinaniu. Krew pełną wyznakowaną fluorescencyjnie od normalnego dawcy lub od pacjenta z vWD perfundowano nad kolagenem w 150 sś1 przez 2 minuty. Następnie następowała natychmiastowa perfuzja normalnej krwi (normalnej), krwi vWD (vWD) lub krwi vWD uzupełnionej oczyszczonym rozpuszczalnym vWf (10 .g / ml; vWD + vWf) na wstępnie uformowaną reaktywną powierzchnię płytek po 1800 s. 1. Wzrost zakrzepu monitorowano w czasie rzeczywistym za pomocą mikroskopii konfokalnej w 1-minutowych odstępach przez 5 minut. (c) Skrzepliny płytkowe utworzone po 5 minutach perfuzji zostały zrekonstruowane przy użyciu komputerowego programu do analizy obrazu. Górne panele przedstawiają ukośny widok, aby zademonstrować pokrycie powierzchni, podczas gdy dolne panele przedstawiają widok z boku, aby pokazać różnice w wysokości skrzepliny. (d) Całkowitą objętość skrzepu w polu zainteresowania (25 192. m2) obliczono przy użyciu narzędzia Image Tool. Uwaga: Przy obliczaniu objętości skrzepu, pierwsze 2 .m pominięto w analizie, aby wykluczyć wstępnie uformowane monowarstwy płytek. Wyniki pochodzą z eksperymentu reprezentatywnego dla 2. badań in vivo. Badania in vivo zakrzepicy szczurów przeprowadzono zgodnie ze zmodyfikowaną metodą Denisa i in. (15). Krezowe tętniczki i żyły (30. 40. M) samców szczurów Wistar zostały uszkodzone przez fotoaktywację (długość fali wzbudzającej 550 nm, 10. 30 sekund) podawanego układowo różu bengalskiego (30 mg / kg) (16). Wolne rodniki uwolnione od zdeaktywowanego różanego bengalu powodują strukturalne uszkodzenie ściany naczynia, powodując zapoczątkowanie powstawania zakrzepu płytek krwi (16)
[przypisy: chora tarczyca objawy, candida albicans objawy, budowa stawu kolanowego ]